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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章揭秘實(shí)驗(yàn)室神器:等度液相色譜分析儀的五大核心功能

揭秘實(shí)驗(yàn)室神器:等度液相色譜分析儀的五大核心功能

更新時(shí)間:2025-12-25點(diǎn)擊次數(shù):111
  等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀(HPLC)的類型,它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中,流動(dòng)相的組成和比例在分析過程中保持恒定,因此得名“等度”。
  等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動(dòng)相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后,樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,它們在色譜柱中的移動(dòng)速度也會(huì)不同,從而實(shí)現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測器,檢測器將樣品組分的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),經(jīng)過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析,最終生成分析報(bào)告。
  等度液相色譜分析儀的主要功能:
  一、高效分離功能
  基于固定相的組分分離
  原理:利用色譜柱內(nèi)固定相(如硅膠、聚合物填料)與樣品中各組分間的相互作用差異(如分配系數(shù)、吸附能力、離子交換能力),實(shí)現(xiàn)混合物的物理分離。
  等度優(yōu)勢:流動(dòng)相組成恒定,分離過程穩(wěn)定,適合分離極性差異適中、保留時(shí)間分布較窄的樣品(如某些藥物中間體、食品添加劑)。
  多模式分離能力
  反相色譜(RPC):固定相為非極性(如C18),流動(dòng)相為極性溶劑(如水-甲醇),適用于分離非極性至中等極性化合物(如脂溶性維生素、激素)。
  正相色譜(NPC):固定相為極性(如硅膠),流動(dòng)相為非極性溶劑(如正己烷-異丙醇),適用于分離極性化合物(如糖類、氨基酸)。
  離子交換色譜(IEC):固定相帶電荷(如磺酸基、季銨基),通過離子交換作用分離帶電組分(如蛋白質(zhì)、核酸)。
  凝膠滲透色譜(GPC):按分子大小分離(如聚合物分子量分布分析)。
  二、精準(zhǔn)定量功能
  高靈敏度檢測
  檢測器類型:
  紫外-可見檢測器(UV-Vis):檢測具有紫外吸收的組分(如大多數(shù)有機(jī)化合物),靈敏度可達(dá)ng級。
  熒光檢測器(FLD):檢測熒光物質(zhì)(如某些維生素、藥物代謝物),靈敏度比UV-Vis高1-3個(gè)數(shù)量級。
  示差折光檢測器(RID):通用型檢測器,適用于無紫外吸收的組分(如糖類、聚合物),但靈敏度較低。
  等度應(yīng)用:在恒定流動(dòng)相條件下,檢測器基線穩(wěn)定,定量重復(fù)性高。
  定量分析方法
  外標(biāo)法:通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品峰面積或峰高計(jì)算濃度,適用于已知標(biāo)準(zhǔn)品的定量。
  內(nèi)標(biāo)法:加入內(nèi)標(biāo)物(與樣品性質(zhì)相似但不出現(xiàn)在樣品中),通過內(nèi)標(biāo)物與樣品峰面積比值定量,可校正進(jìn)樣誤差和儀器波動(dòng)。
  標(biāo)準(zhǔn)加入法:向樣品中加入已知量標(biāo)準(zhǔn)品,通過響應(yīng)變化計(jì)算原始濃度,適用于基質(zhì)復(fù)雜或無標(biāo)準(zhǔn)品的情況。
  三、靈活定性功能
  保留時(shí)間定性
  在相同色譜條件下,未知組分的保留時(shí)間與已知標(biāo)準(zhǔn)品一致時(shí),可初步判定為同一物質(zhì)。
  等度優(yōu)勢:保留時(shí)間重復(fù)性高,定性結(jié)果可靠。
  聯(lián)用技術(shù)增強(qiáng)定性能力
  液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS):通過質(zhì)譜儀獲取組分的分子量及結(jié)構(gòu)信息,實(shí)現(xiàn)未知物鑒定(如代謝物分析、雜質(zhì)篩查)。
  液相色譜-二極管陣列檢測器(LC-DAD):同時(shí)檢測多波長下的吸收光譜,通過光譜庫匹配定性(如中藥成分分析)。
  液相色譜-核磁共振聯(lián)用(LC-NMR):直接獲取組分的核磁共振譜圖,確定分子結(jié)構(gòu)(如天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)解析)。
  四、自動(dòng)化操作功能
  自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)
  支持多樣品連續(xù)進(jìn)樣,減少人工操作誤差,提高分析通量(如高通量藥物篩選)。
  可設(shè)置進(jìn)樣體積、清洗程序及進(jìn)樣順序,適應(yīng)不同分析需求。
  梯度程序模擬(等度模式下的優(yōu)化)
  雖為等度儀器,但可通過調(diào)整流動(dòng)相流速、柱溫或選擇不同色譜柱,模擬部分梯度分離效果(如優(yōu)化分離條件)。
  部分儀器支持多波長檢測或柱切換技術(shù),擴(kuò)展分析范圍。
  系統(tǒng)自檢與故障診斷
  自動(dòng)檢測泵壓力、檢測器信號(hào)、流動(dòng)相液位等參數(shù),異常時(shí)報(bào)警并提示解決方案(如泄漏檢測、氣泡排除)。
  五、數(shù)據(jù)可靠性與合規(guī)性功能
  符合法規(guī)要求的數(shù)據(jù)管理
  審計(jì)追蹤:記錄所有操作步驟(如參數(shù)修改、樣品信息輸入),確保數(shù)據(jù)可追溯。
  電子簽名:對關(guān)鍵操作(如方法保存、結(jié)果審核)進(jìn)行電子簽名,滿足FDA 21 CFR Part 11等法規(guī)要求。
  數(shù)據(jù)備份與恢復(fù):自動(dòng)備份分析數(shù)據(jù),防止意外丟失。
  多格式數(shù)據(jù)輸出
  支持導(dǎo)出色譜圖、峰表、方法文件等至通用格式(如CSV、PDF),便于與其他軟件(如Excel、ChemStation)兼容。
 

等度液相色譜分析儀

 

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